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**組織化學染色結(jié)果評價

  對免**組織化學染色所得結(jié)果的判斷要持科學態(tài)度,根據(jù)對照實驗準確判斷陽性和陰性結(jié)果,排除假陽性和假陰性結(jié)果。為使實驗結(jié)果準確無誤,應(yīng)多次重復進行實驗。*后得出科學的結(jié)論。為達此目的,首先應(yīng)學會區(qū)別特異性和非特異性染色結(jié)果。非特異性染色的特點是:細胞和間質(zhì)染色無區(qū)別或間質(zhì)染色更強;染色無特定部位,無結(jié)構(gòu)性;染色五分布規(guī)律,某一部位均勻著色;染色出現(xiàn)在切片的干燥部位、邊緣、刀痕或組織折疊處。排除非特異性染色之后,應(yīng)確定特異性染色在組織細胞中的部位和程度,并且考慮是否有必要進行半定量測定。
《一》以抗原表達模式定位
   1.細胞質(zhì)內(nèi)彌散性分布,多數(shù)**組織化學染色為胞質(zhì)型陽性反應(yīng),如細胞角蛋白(Cytokeratin,CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
**組織化學染色(SP法。AEC顯色)
胚胎12天人員端腦背側(cè)腦室區(qū)司見波形蛋L(Vimentin)**反應(yīng)陽性細胞:其胞體位于腦室區(qū)。一端伸出長突起到達軟腦膜
 
   2.細胞核周邊胞質(zhì)內(nèi)分布,其判別要點是細胞核輪廓被勾畫得很清楚,如CD3多克隆抗體的染色。
   3.胞漿內(nèi)局限性點狀陽性反應(yīng),如CDI$抗體的染色。
   4.細胞膜線性陽性反應(yīng),大多數(shù)**細胞標志物的染色均如此,如CD20。
   5.細胞核陽性反應(yīng),如BrdU、Ki-67及雌、孕**受體蛋白等。
   有些抗原的陽性表達可同時出現(xiàn)在細胞的不同部位,如細胞質(zhì)和細胞膜等。
 
《二》陽性染色結(jié)果定量
   1.計算**反應(yīng)陽性細胞數(shù)方法是選擇每個樣品中10個非重疊視野,計算每個視野中的陽性細胞與總細胞數(shù)的百分比,取平均數(shù),連續(xù)觀察和計算至少二個條件相同的樣品。得出數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學處理后可在計算機MicrosoftExcel中作出柱形圖。
   2.另一種方法以染色陽性強度和陽性檢出率相結(jié)合而定,一般陽性細胞數(shù)在0~25為陰性,25~50為+,50~75為++,75以上為+++。此種判定方法容易出現(xiàn)人為誤差,現(xiàn)已很少在論文中出現(xiàn)。
    3.圖像分析系統(tǒng)檢測陽性結(jié)果。