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上海藍(lán)基生物科技有限公司
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**熒光標(biāo)記技術(shù)
**熒光技術(shù)是利用物質(zhì)吸收光能后,產(chǎn)生激發(fā)態(tài)而發(fā)光的特性。將具有這種特性的熒光素(異硫氰熒光黃或羅丹明
B200)
用化學(xué)方法結(jié)合在特異的抗體或抗原上,又不損害其抗體或抗原活性的一種熒光顯微鏡下的示蹤技術(shù)??贵w與抗原的結(jié)合是高度特異的,所以只要知道其中的一種因子,也就知道了另一種因子。
**熒光技術(shù)就是利用上述兩種特性,把不可見(jiàn)的抗原抗體的反應(yīng)(一抗)與被熒光素標(biāo)記的抗體(抗抗體)反應(yīng),變?yōu)槿庋劭梢?jiàn)的熒光,在熒光顯微鏡下我們所能見(jiàn)到的亮綠熒光,不是標(biāo)本本身發(fā)出的,而是熒光物質(zhì)受到激發(fā)后而發(fā)出的亮綠色熒光。
**熒光技術(shù)利用了物理、化學(xué)、組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、生物學(xué)等綜合性技術(shù),可以檢查多種抗原抗體復(fù)合物,只要知道一種抗體或抗原,就可以知道其對(duì)應(yīng)的抗原或抗體。
三、**熒光抗體技術(shù)可分為直接法、間接法和補(bǔ)體法三種類(lèi)型。直接法只有抗原、抗體兩個(gè)因子直接參與反應(yīng),利用熒光標(biāo)記的特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,以此來(lái)鑒定未知抗原,此方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單快速,特異性高,非特異性反應(yīng)少。但一種熒光標(biāo)記抗體只能針對(duì)一種抗原,敏感性較差和不能檢查未知抗體。間接法是利用熒光標(biāo)記抗**球蛋白抗體(抗抗體),鑒定未知抗原或抗體。補(bǔ)體法是利用熒光標(biāo)記抗補(bǔ)體抗體,以鑒定未知抗原或抗體,是補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)的原理。此方法只需要一種熒光標(biāo)記抗補(bǔ)體抗體,就可以檢查所有種系的抗原抗體系統(tǒng)。因?yàn)檠a(bǔ)體可被任何哺乳類(lèi)的抗體抗原系統(tǒng)所固定,并與間接法有同樣的優(yōu)點(diǎn)。但是這種方法中的補(bǔ)體不穩(wěn)定,熒光標(biāo)記抗補(bǔ)體抗體不能與之固定的補(bǔ)體結(jié)合,使試驗(yàn)失敗,而且非特異性熒光也比較強(qiáng)。
熒光抗體技術(shù)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的很多方面,在臨床**學(xué)中主要用于在**診斷、寄生蟲(chóng)學(xué)診斷、病毒學(xué)診斷、**病理方面的診斷、血液中
B
及
T
細(xì)胞的鑒定、**和酶的局部組織定位、一些器官移植抗原鑒定、組織中**球蛋及補(bǔ)體組分的檢測(cè)及自身**病等方面。
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